CXCR2在膀胱癌干细胞增殖、凋亡及侵袭转移中的作用及机制

摘要

目的探讨趋化因子受体2(CXCR2)在膀胱癌干细胞增殖、凋亡及侵袭转移中的作用及机制。方法取膀胱癌肿瘤组织,培养成悬浮肿瘤细胞球,用流式细胞仪筛选出CD44+膀胱癌干细胞。采用Western blotting法检测干细胞标志基因Oct4、Sox2蛋白表达,并检测CXCR2蛋白表达。培养膀胱癌干细胞,将其分为sh-CXCR2组和转染对照组,sh-CXCR2组加入慢病毒转染试剂polybrene与CXCR2敲减慢病毒,转染对照组加入慢病毒转染试剂polybrene与对照scramble。转染72 h后,采用MTS法检测两组细胞增殖率,软琼脂克隆实验观察细胞克隆形成能力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Transwell小室转移实验和Boyden侵袭实验观察细胞转移和侵袭能力,Western blotting法检测两组细胞中凋亡相关蛋白FOXO1A、Bcl-2以及侵袭转移相关蛋白MMP-2、MMP-9的相对表达量。结果流式细胞仪分选出CD44+细胞占全部细胞的2.37%,CD44+细胞中Oct4、Sox2、CXCR2蛋白表达水平高于CD44-细胞(P均<0.05)。与转染对照组比较,sh-CXCR2组细胞增殖率降低,克隆球形成数量减少,细胞凋亡率升高,侵袭和转移实验的穿膜细胞数量减少,细胞中FOXO1A、Bcl-2、MMP-2、MMP-9蛋白表达降低(P均<0.05)。结论CXCR2在膀胱癌干细胞中高表达,抑制其表达可以降低膀胱癌干细胞的增殖、侵袭、转移能力,促进细胞凋亡;其机制可能是通过作用于凋亡相关蛋白FOXO1A、Bcl-2和侵袭转移相关蛋白MMP-2、MMP-9实现的。