胰高血糖素对不同葡萄糖培养条件下胰岛β细胞分泌胰岛素的影响及机制

摘要

目的 探讨不同浓度葡萄糖环境下胰高血糖素(Gn)对胰岛β细胞系MIN6细胞分泌胰岛素(INS)及对环磷酸腺苷(cAMP)信号通路的影响.方法 培养胰岛β细胞系MIN6细胞.①分为正常对照1组、低糖1组、高糖1组,分别在葡萄糖终浓度为0、2.8、16.7 mmol/L培养基中培养,每组均给予0、500、1 000 ng/L的Gn干预1h,采用ELISA法检测细胞上清液INS、cAMP含量,评价不同浓度Gn对MIN6细胞分泌INS及cAMP的影响.②分为正常对照2组、低糖2组、高糖2组,分别在葡萄糖终浓度为0、2.8、16.7 mmol/L培养基中培养,并均加入500 μLcAMP信号通路刺激剂盐酸异丙肾上腺素(ISO)孵育10 min,然后每组均给予0、500、1 000 ng/L的Gn干预1h,采用ELISA法检测细胞上清液INS、cAMP含量,评价加入ISO后不同浓度Gn对MIN6细胞分泌INS及cAMP的影响.结果 ①正常对照1组、低糖1组、高糖1组中,1 000 ng/L Gn干预后INS、cAMP含量均高于500、0 ng/L时,500ng/L Gn干预后INS、cAMP含量均高于0 ng/L时(P均＜0.05).②正常对照2组、低糖2组、高糖2组中,1 000ng/L Gn干预后INS、cAMP含量均高于500、0 ng/L时,500 ng/L Gn干预后INS、cAMP含量均高于0 ng/L时(P均＜0.05).在未添加ISO情况下,细胞上清液cAMP与INS含量呈正相关(r=0.897 2,r2=0.804 9,P＜0.05);在添加ISO后,细胞上清液cAMP与INS含量也呈正相关(r=0.894 7,r2=0.800 5,P＜0.05).结论 Gn可促进不同葡萄糖水平下胰岛β细胞INS的分泌,其浓度较高时对INS促进作用更明显;其机制可能为Gn通过cAMP信号通路促进INS分泌.