人BMP2及VEGF双基因共表达腺病毒穿梭质粒的构建及鉴定

摘要

目的构建人骨形态发生蛋白2(BMP2)与血管内皮生长因子(VEGF)双基因腺病毒穿梭质粒.方法对pCU-CAGGS-hVEGF165的目的基因亚克隆并引入新的酶切位点,定向连入腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV, 将质粒pcDNA3.1-BMP2及pIRES酶切后,将BMP2和IRES片段定向连入pShuttle-CMV-hVEGF165,构建可同时表达两个目的基因重组质粒pShuttle-CMV-hBMP2-IRES-hVEGF165,进行酶切分析及序列测定.结果酶切分析及核酸序列测定证实重组质粒构建正确.结论成功构建了BMP2及VEGF双基因腺病毒穿梭质粒;为联合基因治疗骨缺损的研究奠定了基础.