真菌提取物JN219抗轮状病毒机制的研究

摘要

目的 探讨真菌提取物JN219抑制轮状病毒(RV)入侵宿主细胞的机制.方法 构建原核表达载体pET-30a-VP4,异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达并用His抗体镍柱亲和层析纯化病毒外壳蛋白VP4,利用体外竞争抑制RV-MA104细胞感染模型,观察与VP4共孵育后含JN219提取物抑制RV活性的变化.结果构建的pET-30a-VP4载体可表达VP4重组蛋白(约88 kD),镍柱纯化的VP4蛋白含量为0.75 mg/ml,与VP4作用后JN219提取物抗病毒指数由36.7降低为9.1,半数有效浓度由(0.163±0.02)mg/ml升为(0.702±0.13)mg/ml,半数中毒浓度由5.99 mg/ml升至6.38 mg/ml,P均＜0.05.结论 与病毒外壳蛋白VP4结合,进而阻断病毒穿入细胞可能是JN219抗RV的主要机制之一.