亚砷酸诱导人鼻咽癌细胞RECK基因表达及其去甲基化作用观察

摘要

目的 探讨亚砷酸诱导鼻咽癌细胞株CNE-2Z中RECK基因的表达情况.方法 体外培养CNE-2Z细胞,加入0.50、1.00、2.00、4.00 μmol/L 亚砷酸处理后,利用台盼蓝染色检测其对CNE-2Z细胞生长抑制情况,流式细胞术检测内侧细胞周期的改变;并用甲基特异性PCR检测亚砷酸处理前后RECK基因的甲基化情况,RT-PCR和Western blot分别检测RECK基因的mRNA和蛋白水平.结果 0.50～4.00 μmol/L亚砷酸能抑制CNE-2Z细胞的增殖,不同浓度亚砷酸处理24～72 h后,IC50值分别为(1.47±0.04)、(1.04±0.05)、(0.47±0.06)μmo/L.亚砷酸能使CNE-2Z细胞阻滞于S期和G2/M期;另外,随着亚砷酸浓度的增高,RECK基因甲基化水平逐渐减弱,且非甲基化RECK逐渐增强,并能促进RECK基因mRNA和蛋白的表达(P均<0.05).结论 亚砷酸能促进CNE-2Z细胞RECK基因去甲基化,并提高其表达水平,从而发挥抑制细胞增长的效应.