转染CDX2-siRNA并加入人参皂苷Rh2培养的K562细胞增殖抑制率、凋亡率变化

摘要

目的：观察转染尾型同源盒基因（CDX2）siRNA并加入人参皂苷Rh2培养的人慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞增殖抑制率、凋亡率变化。方法将对数生长期的人慢性粒细胞白血病K562细胞，分为实验组和对照组，实验组包括A、B、C组，A组不转染，B、C组分别转染CDX2-siRNA和阴性对照序列（CDX2-siRNA-NC），然后实验组均加入60μmol／L的人参皂苷Rh2培养。对照组K562细胞常规培养。培养6、12、24、36、48 h采用MTT法测算各实验组细胞增殖抑制率；培养48 h采用Annexin Ⅴ-FITC／PI 双染法和流式细胞术测算各实验组细胞凋亡率。培养48 h时采用实时荧光定量PCR法检测各实验组细胞CDX2、Ph标记染色体或（和）BCR／ABL基因重排（BCR-ABL融合基因）mRNA，采用Western blotting法检测各组细胞CDX2、BCR-ABL融合蛋白。结果培养6、12、24、36、48 h时B组细胞增殖抑制率均高于A、C 组（P均＜0．05）。培养48 h时A、B、C 组的细胞凋亡率分别为26．50％±0．72％、73．20％±1．06％、32．00％±1．34％，B组细胞凋亡率均高于A、C组。培养48 h时，B组细胞CDX2、BCR-ABL融合基因mRNA及蛋白相对表达量均低于A、C组，P均＜0．05。结论转染CDX2-siRNA并加入人参皂苷Rh2培养的人慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞增殖抑制率、凋亡率升高，这可能是转染CDX2-siRNA降低K562细胞CDX2表达，然后降低BCR-ABL融合基因表达导致的。