糙叶败酱碱对肺癌 SPC-A1细胞增殖的影响及机制

摘要

目的：观察糙叶败酱碱对肺癌SPC-A1细胞增殖的影响，探讨其作用机制。方法取对数生长期的人肺腺癌SPC-A1细胞，分别加入适量糙叶败酱碱，使其终浓度为0、5、10、15、20、30、40μmol／L，继续培养24、48 h，检测细胞增殖情况，结果显示糙叶败酱碱呈剂量和时间依赖性抑制细胞增殖，最终选用高于及低于半数抑制浓度的10、20μmol／L糙叶败酱碱处理48 h进行后续研究。取对数生长期的SPC-A1细胞，分别加入0、10、20μmol／L糙叶败酱碱处理48 h，通过流式细胞仪检测G0／G1、S、G2／M期细胞百分比及细胞凋亡率，采用荧光实时定量PCR法检测p21、p53、Bax、细胞周期蛋白依赖性激酶1（ CDK1）、血管内皮生长因子（ VEGF ）、Bcl-2 mRNA相对表达量，采用Caspase-3、Caspase-8活性检测试剂盒检测二者活性（以OD值表示活性）。结果与未加糙叶败酱碱（0μmol／L）细胞比较，10、20μmol／L糙叶败酱碱处理的细胞G0／G1期细胞百分比增加，凋亡率增加，p21、p53、Bax mRNA表达升高，VEGF、CDK1、Bcl-2 mRNA表达降低，Caspase-3和Caspase-8活性增加，P均＜0．05。结论糙叶败酱碱可抑制肺癌SPC-A1细胞增殖，激活CDK1、p51、p53等介导的凋亡途径促进细胞凋亡、阻滞细胞周期，可能是其作用机制。