miR-101对结直肠癌细胞放疗敏感性的影响及机制探讨

摘要

目的 观察miR-101对结直肠癌细胞放疗敏感性的影响,并探讨其分子机制.方法 取结直肠癌细胞株SW620、SW480,稳定过表达miR-101细胞株SW620(miR101-SW620)及其阴性对照GV209-SW620,瞬时沉默miR-101表达细胞株SW480(SW480-miR101)及其阴性对照SW480-NC,采用Western blotting法检测细胞中miR-101靶基因Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)及其下游关键蛋白细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)、人Ras同源基因家族成员A(RhoA).取SW620、GV209-SW620、miR101-SW620细胞,分别给予0、2、4、6、8 Gy射线处理24 h;Westernblotting法检测DNA损伤标志性蛋白γ-H2AX、细胞凋亡标志蛋白Caspase-3判断细胞放疗敏感性变化,同时检测细胞Rac1、Cdc42、RhoA蛋白.结果 与SW620、GV209-SW620细胞比较,miR101-SW620细胞Rac1、Cdc42、RhoA蛋白表达降低(P均＜ 0.05);与SW480、SW480-NC细胞比较,SW480-miR101细胞Rac1、Cdc42、RhoA蛋白表达均增高(P均＜ 0.05).随着照射剂量增加,结直肠癌细胞γ-H2AX、Caspase-3表达均增高,而Rac1、RhoA、Cdc42蛋白表达均降低(P均＜ 0.05);与同等照射剂量下SW620、GV209-SW620细胞比较,miR101-SW620细胞γ-H2AX、Caspase-3蛋白表达均增高,而Rac1、RhoA、Cdc42蛋白表达均降低(P均＜0.05).结论 miR-101可能通过调控Rac1/Cdc42/RhoA信号通路增强结直肠癌细胞对放疗的敏感性.