干扰微小染色体维持基因表达对人胰腺癌细胞增殖和迁移的干预作用及其机制

摘要

目的观察干扰微小染色体维持(MCM)基因表达对胰腺癌PANC-1细胞增殖和迁移的干预作用,并探讨其作用机制。方法取人胰腺癌PANC-1细胞进行培养,将细胞分为shMCM2、shMCM6组和对照组。shMCM2、shMCM6组分别加入shMCM2、shMCM6慢病毒溶液进行转染,构建MCM2和MCM6基因沉默稳定细胞;对照加入含对照shRNA慢病毒溶液。采用CCK-8法检测三组24、48、72 h细胞增殖情况,细胞划痕实验和Transwell实验观察细胞横向和纵向迁移能力,RT-qPCR法检测细胞周期蛋白Cyclin A1、B1、D1、E1 mRNA表达。结果随着培养时间延长,三组细胞活性均不断增加,shMCM2和shMCM6组在72 h的增殖率低于对照组。shMCM2组细胞横向迁移的划痕面积比和纵向迁移率较对照组降低,shMCM6组细胞纵向迁移率低于对照组(P<0.05或<0.01)。与对照组相比,shMCM2组Cyclin A1、B1、D1、E1 mRNA表达水平降低,shMCM6组Cyclin A1、B1 mRNA表达水平降低(P<0.05或<0.01)。结论MCM2、MCM6表达缺失可抑制胰腺癌PANC-1细胞的增殖和迁移,其机制可能与下调细胞周期蛋白表达有关。