马兜铃酸诱导TM3小鼠睾丸间质细胞凋亡机制

摘要

目的:探讨马兜铃酸(AAs)对TM3细胞凋亡的作用及分子机制.方法:用2.5、10、25、100、400、1000μmol/L浓度的马兜铃酸分别对TM3细胞作用24、48、72 h后,CCK-8法测定细胞活力;25、100、400μmol/L的马兜铃酸对TM3细胞作用48 h后,TUNEL检测细胞凋亡率,实时荧光定量法检测Caspase通路相关基因Caspase-3、Caspase-9和Bax mRNA相对表达情况,并通过Western blot法检测凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9和Bax蛋白表达水平变化.结果:不同浓度的马兜铃酸对小鼠睾丸间质细胞的活力有一定的抑制作用;用25、100、400μmol/L浓度的马兜铃酸处理TM3细胞48 h后,通过TUNEL染色发现,不同浓度的马兜铃酸能够促进细胞的凋亡,Caspase-3、Caspase-9、Bax mRNA和蛋白表达水平升高.结论:马兜铃酸通过Caspase途径促进TM3细胞的凋亡来影响生殖细胞的发育.