圈卷产色链霉菌尼可霉素生物合成基因sanA的克隆、结构和功能

摘要

圈卷产色链霉菌是尼可霉素产生菌 ,经紫外线诱变后 ,以赤星灰霉为指示菌筛选到遗传稳定的尼可霉素生物合成阻断突变株 ,选择其中的NBB1 9为受体 ,以质粒pIJ70 2为克隆载体 ,从野生型圈卷产色链霉菌的DNA文库中克隆到了 6kb的DNA片段 ,能互补NBB1 9使之恢复尼可霉素的产生能力 .对 6kbDNA片段中的部分片段进行了序列分析 ,结果表明 2 71 0bpDNA片段包含一个 1 36 5bp的完整开放阅读框架 ,编码一个由 45 4个氨基酸残基组成的蛋白质 ,该基因命名为sanA .蛋白序列数据库比较结果表明 ,sanA编码的蛋白质氨基酸序列与Pyrococcushorikoshii的甲基转移酶有较高的同源性 ,35 3个氨基酸残基中有 2 5 %的一致性 .用基因破坏策略研究了sanA的功能 ,野生型菌株sanA基因被破坏后导致失去合成尼可霉素的能力 ,表明sanA是尼可霉素生物合成中的一个新的重要基因 .