马尾松毛虫质型多角体病毒单克隆抗体的制备和应用

摘要

纯化的马尾松毛虫质型多角体病毒（ＤｐＣＰＶ）云南文山株的病毒粒子经ＳＤＳＰＡＧＥ分析，其结构蛋白有１２０ｋｄ、１１６ｋｄ、１１０ｋｄ、６６ｋｄ和３３ｋｄ５个组分，而它的多角体蛋白含３０ｋｄ和２８ｋｄ两个主要组分。以纯化的ＤｐＣＰＶ粒子为抗原制备了２Ｄ５、２Ｄ１０、３Ｄ４和６Ｂ３共４种单克隆抗体，并测定了它们的亚类。制得的单克隆抗体用于ＤｐＣＰＶ的ＥＬＩＳＡ检测。对ＤｐＣＰＶ在棉铃虫卵巢细胞系ＳＦＥＨＡ８２１２和ＳＦＥＨＡ８３１中增殖动态的检测结果表明，ＤｐＣＰＶ感染培养细胞具有释放病毒量小和呈现持续感染等特点。用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法在ＳＦＥＨＡ８３１细胞感染ＤｐＣＰＶ后第１８ｈ检测到病毒抗原的合成。运用所建立的免疫学检测方法，对几批采自ＤｐＣＰＶ防治林区的幼虫样品进行分析，结果表明，该方法适用于对ＤｐＣＰＶ的防治效果及其自然流行进行长时期、大规模的监测。