TA29-Barnase基因导致抗虫转基因欧洲黑杨雄性不育的研究

摘要

取在1/2MS+NAA0.02mg/L培养基中发育4～6周的欧洲黑杨转Bt基因植株15-n-192试管苗幼叶,在MS+BA0.2mg/L+NAA0.02mg/L培养基中培养16h,分别用基因枪法和叶盘法转化TA29-Barnase嵌合基因,其Barnase基因的转化率依次为16.1%和23%,再生株数分别为175/12和71/10.试验表明,选择发育适宜的叶片,利于目的基因转化后的植株再生.进一步用SDS法提取转基因植株总DNA,经PCR检测表明:转化植株基因组中扩增出的DNA片段与Barnase基因的大小一致;Southern Blot分析出转化后的欧洲黑杨基因组中携有Barnase基因片段,进行Dot Blot检测,转化植株有一明显的杂交斑,并证实为阳性转化植株,并通过试管培养,结合林木常规育种方法,获得了转Barnase基因的抗虫欧洲黑杨转基因植株.