枣实蝇特异引物PCR鉴定技术

摘要

在设计的枣实蝇15对引物中,利用种特异引物PCR (SS-PCR)和琼脂糖凝胶电泳技术筛选出1对枣实蝇的特异性引物,引物的特异性用桔小实蝇、瓜实蝇、南瓜实蝇、番石榴实蝇和桃果实蝇等5种实蝇来验证.SS-PCR方法的检测灵敏度用40,20,10,1,0.1,0.01,0.001 ng· μL-等7个不同浓度系列的枣实蝇DNA模板来检测.结果表明,SS-PCR方法的检测限度达0.01 ng·tμL-1以下,最适模板DNA浓度为1～20 ng·μL-1.所设计的引物对枣实蝇不同虫态均能进行特异性扩增,结果准确可靠.该技术体系可用于枣实蝇的鉴定识别与检测监测,对阻止其进一步扩散蔓延具有重要意义.