叶锈菌诱导的小麦叶片抑制差减杂交文库构建及其分析

摘要

[目的]研究叶锈菌诱导小麦叶片的基因表达情况,从分子水平阐明小麦的抗病机制.[方法]以小麦抗叶锈病近等基因系TcLr41为材料,利用抑制差减杂交技术,构建叶锈菌诱导的小麦叶片cDNA文库,随机挑取文库中的阳性克隆测序,并对测序结果进行功能注释和分类.[结果]成功构建了叶锈菌诱导的小麦叶片抑制差减杂交文库,共获得3456个阳性克隆.挑取165个阳性克隆进行测序,获得160条高质量EST.对EST序列进行聚类后,共获得107条非重复序列(Unigene),与GenBank进行BLASTx和BLASTn同源比对,其中70条非重复序列与已知基因同源性很高,占全部非重复序列的65.4%.已知功能的EST涉及植物的能量代谢、信号转导、转录调控及抗病防卫等多方面.[结论]通过对功能已知的基因分析,推测促分裂原活化蛋白激酶(mitogen activatedprotein kinase),丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(setine/threonine protein kinase)、GTP结合蛋白(GTP-bindingprotein)、钙网蛋白(cal reticulin)、过氧化氢酶(catalase)、谷胱甘肽-s-转移酶(glutathione-S-transferase)、多聚泛素基因(polyubiquitin)、锌指蛋白(zinc-finger protein)、肉桂醇脱氢酶(Cinnamyl alcoholdehydrogenase)、转脂蛋白(1iPid transfer protein)、类甜蛋白(thaumatin-like)、几丁质酶(chitinase)等可能参与了小麦与叶锈菌的非亲和互作过程.