葡萄雌能花相关基因VvMS2的克隆及表达分析

摘要

[目的]从欧亚种葡萄‘魏可’和‘钟山红’的花中分离出VvMS2基因,为研究葡萄雌能花形成的分子机理和分子育种奠定基础.[方法]在NCBI中寻找与拟南芥雄性不育基因MS2同源性最高的葡萄序列(CBI29968),设计特异引物进行克隆测序,通过生物信息学方法分析结构特征,利用实时荧光定量RT-PCR技术研究其在‘魏可’各组织中及‘魏可’和‘钟山红’雄蕊发育不同时期中的表达特性.[结果]VvMS2基因cDNA编码区全长为1 755 bp,编码584个氨基酸,含有NAD结合域和雄性不育C-末端区域.VvMS2对应基因组DNA全长2 776 bp,含有9个外显子和8个内含子.基因编码蛋白质分子量为64.74 kD,等电点为8.84.该基因与GenBank中其它来源的MS2蛋白序列的相似性为40％-71％.VvMS2为花蕾特异表达基因,且仅在花粉发育四分体期到二核期有表达,单核期‘魏可’的表达量显著高于同时期‘钟山红’.[结论]推测该基因异常表达与‘钟山红’葡萄雌能花形成有关.