一种快捷的观赏海棠组培苗瞬时基因沉默的方法

摘要

该发明公开了一种快捷的观赏海棠组培苗瞬时基因沉默的方法,将沉默目的基因片段通过酶切连接的方式连接到TRV-GFP载体,转化农杆菌后,通过调整真空抽吸压强和抽吸方式,将携带沉默目的基因的TRV-GFP载体侵染入观赏海棠组培苗中;进一步通过抗生素培养和手提紫外灯荧光筛选,得到观赏海棠沉默阳性株系;沉默目的基因的观赏海棠组培苗阳性植株在侵染7天后,进行表型观察和半定量PCR筛选,从而构建完整的观赏海棠瞬时基因沉默体系.能够快速、高效地侵染观赏海棠组培苗植株,并能够方便进行沉默阳性植株筛选,进行基因沉默分析,改进了木本植物瞬时表达效率低等缺陷,能够应用于观赏海棠基因功能研究,为今后的观赏海棠遗传育种工作奠定基础.