猪繁殖与呼吸综合征病毒在抗体免疫选择压下的变异

摘要

为了确定抗体选择压对PRRSV不同基因变异的影响,将PRRSV野毒株SD0612分别在Marc-145细胞上做两个系列的连续传代,系列Ⅰ培养液中不添加抗SD0612血清,包括A,B,C3个平行的传代系;系列Ⅱ培养液中添加一定比例的抗SD0612血清,包括D,E,F3个平行的传代系.上述传代系连续传代40代,其中有抗体组40代突变株F40获得抗血清后按同样方法连续传代40代进行第二轮抗体选择压实验.各传代系每隔10代收获病毒并对其ORF3,ORF4和ORF5进行扩增、克隆和序列分析.SD0612及其两次传代中有抗体组40代毒突变株F40和e40接种猪后收获血清,进行3个毒株之间的交叉血清中和实验以测定其抗原相关性系数.序列分析显示,两次传代中有抗体组在ORF3,ORF4,ORF5的有义突变与无义突变比值（NS/S）分别为11.0和3.5,0.5和0.67,13.0和4.0;无抗体组NS/S比值则仅为0.33～1.40.有抗体组ORF5和ORF3分别有14和4个稳定的氨基酸突变位点,而这些位点在无抗体组未被发现.交叉血清中和实验结果显示,SD0612与有抗体组突变株F40和e40的抗原性相关系数分别为0.625和0.5.上述结果表明,抗体的选择压能够显著影响PRRSV的ORF5和ORF3的基因变异并能使其抗原性发生改变.