HER-2eu胞外区的基因工程表达及其免疫避孕作用

摘要

目的:研究HER-2/reu胞外区部分片段重组蛋白疫苗在免疫避孕中的作用.方法:构建原核表达重组体pET-hECDu,在大肠杆菌中表达人HER-2eu胞外区部分片段,经Hi-Trap亲和层析柱纯化得到重组蛋白(hECDu),以ELISA法检测其结合活性后免疫雌性小鼠.用ELISA法检测抗HER-2eu体液免疫应答,3H-TdR掺入法检测细胞免疫应答.结果:经原核表达系统成功纯化得到与理论分子量77 ku(1 u=1 Da)相符的hECDu,并证实其可与抗HER-2eu胞外区特异性单克隆抗体结合.该重组蛋白疫苗可诱导雌鼠产生较高水平体液及细胞免疫应答.其生育力(平均产仔数4.0±1.8)与对照组(7.8±1.3)相比明显降低,但免疫鼠产后4 d子宫及卵巢均无明显病理改变.结论:经原核表达系统成功纯化得到HER-2eu胞外区部分片段重组蛋白,该蛋白疫苗可在小鼠中诱导产生免疫避孕效应.