lncRNA MEG3对视网膜母细胞瘤细胞增殖与迁移的作用及其机制研究

摘要

目的 探讨长链非编码RNA母系表达基因3(lncRNA MEG3)对视网膜母细胞瘤(RB)细胞增殖、迁移的作用及其机制研究.方法 将对数生长期的人RB细胞分为对照组(不做任何处理)、NC组(含lncRNA MEG3-NC无序干扰序列的pcDNA3.1质粒)、lncRNA MEG3组(含lncRNA MEG3序列的pcDNA3.1质粒)、激活剂组(含lncRNA MEG3序列的pcDNA3.1质粒+Wnt/β-catenin通路激活剂LiCl).利用RT-qPCR检测各组RB细胞中lncRNA MEG3的相对表达水平;CCK-8法检测lncRNA MEG3对RB细胞增殖的抑制作用;Transwell法检测lncRNA MEG3对RB细胞迁移的影响,RT-PCR检测各组RB细胞中Wnt1、β-catenin、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1) mR-NA相对表达水平;Western blot检测各组RB细胞中Wnt1、β-catenin、Cyclin D1蛋白相对表达水平.结果 对照组、NC组、lncRNA MEG3组和激活剂组RB细胞中lncRNA MEG3相对表达水平分别为0.81±0.27、0.78±0.26、3.88±0.39、3.76±0.38.与对照组和NC组相比,lncRNA MEG3组和激活剂组RB细胞中lncRNA MEG3相对表达水平均升高(均为P＜0.05).与NC组相比,ln-cRNA MEG3组RB细胞培养24h、48 h、72 h细胞增殖抑制率逐渐升高(均为P＜0.05);与ln-cRNA MEG3组相比,激活剂组RB细胞培养24 h、48 h、72 h细胞增殖抑制率逐渐降低(均为P＜0.05).NC组、lncRNA MEG3组、激活剂组RB细胞增殖抑制率均随时间延长而升高(均为P＜0.05).与对照组和NC组相比,lncRNA MEG3组和激活剂组RB细胞迁移数均明显减少(均为P ＜0.05);与lncRNA MEG3组相比,激活剂组RB细胞迁移数增多(P＜0.05).与对照组和NC组相比,lncRNA MEG3组和激活剂组RB细胞中Wnt1、β-catenin、Cyclin D1 mRNA和蛋白相对表达水平均明显降低(均为P ＜0.05);与lncRNA MEG3组比较,激活剂组RB细胞中Wnt1、β-catenin、Cyclin D1 mRNA和蛋白相对表达水平均有升高(均为P＜0.05).结论 过表达ln-cRNA MEG3可抑制人RB细胞增殖及迁移,其可能是通过阻断Wnt/catenin通路发挥作用的.