Arresten在氧诱导小鼠视网膜新生血管形成中的抑制作用及机制

摘要

目的 探讨Arresten在氧诱导小鼠视网膜新生血管形成中的抑制作用及机制.方法 选取48只出生后7d健康清洁级C57BL/6J幼鼠,随机分为氧诱导视网膜病变(oxygen induced retinopathy,OIR)组、OIR+Arresten组和常氧组,每组16只.OIR+ Arresten 组及OIR组幼鼠在体积分数为(75±2)％的高氧环境下饲养5d,然后转移至正常氧气环境中饲养5d,其中OIR+ Arresten组幼鼠于高氧饲养刚结束时,给予双眼玻璃体内注射Arresten蛋白.常氧组幼鼠则在常规氧气环境中连续饲养10 d.在鼠龄17 d时,各组取6只幼鼠经股静脉注射异硫氰酸葡聚糖溶液处死并摘出眼球,视网膜铺片后观察视网膜的血管形态、计算无灌注区面积.同时对小鼠眼球视网膜行石蜡切片和HE染色,计算侵入玻璃体内血管内皮细胞核的数量.同时,通过细胞培养实验,利用MTT法检测Arresten蛋白对人血管内皮细胞增殖的抑制作用.结果 视网膜铺片结果显示,常氧组、OIR组、OIR+ Arresten组视网膜无灌注区相对面积分别为(2.35±1.62)％、(57.28±9.36)％和(20.38±8.69)％,三组间总体比较,差异有统计学意义(F=18.732,P＜0.05),且OIR组无灌注区相对面积显著高于OIR+ Arresten组,差异有统计学意义(P＜0.05).常氧组小鼠视网膜的内界膜结构仍保持平滑完整,未发现有新生血管侵入玻璃体内.OIR组和OIR+ Arresten组每张切片上血管内皮细胞核的数量分别为(15.18±4.83)个、(7.33±3.88)个,其中OIR+ Arresten组侵入玻璃体内新生血管内皮细胞核的数量显著低于OIR组,差异有统计学意义(P＜0.05).Arresten蛋白对人脐静脉内皮细胞增殖的抑制率随着其浓度的升高而增加,但当Arresten蛋白浓度达到1000 μg·L-1时,人脐静脉内皮细胞的增殖抑制率达到顶峰,为(58.00±0.65)％.结论 Arresten蛋白能够抑制氧诱导的小鼠视网膜新生血管形成,通过抑制血管内皮细胞增殖来抑制新生血管形成.