高糖对人晶状体上皮细胞硫醇转移酶表达的影响

摘要

目的 观察高浓度葡萄糖对人晶状体上皮细胞硫醇转移酶(thioltransferase,TTase)表达的影响.方法 将体外培养的人晶状体上皮细胞分别用葡萄糖浓度为5.5 mmo] ·L-1(正常对照组)、15.5 mmol·L-1、25.5 mmol·L-1及35.5 mmol·L-1(不同浓度高糖组),胎牛血清体积分数均为15％的DMEM培养液培养,同时设5.5 mmol·L-1葡萄糖+30.0 mmol·L-1甘露醇高渗对照组,24 h后Western-blotting检测TTase表达情况选择35.5 mmol· L-1高糖浓度培养细胞,分别在0h、2h、8h、16h、24 h时间点收集细胞,Western-blotting检测TTase表达,并测定TTase活性,细胞内总谷胱甘肽(T-GSH)、还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量,计算GSSG与T-GSH的比值.结果 TTase表达随葡萄糖浓度增加逐渐增强,在35.5mmol ·L-1高糖组中表达最强,约为正常对照组的2.3倍(P＜0.01),25.5 mmol·L-1高糖组约为正常对照组1.7倍(P＜0.05),甘露醇高渗对照组TTase表达与正常对照组相比无明显变化(P＞0.05) 在35.5 mmol·L-1高糖处理后2h,TTase表达开始增高,8h表达达到高峰,约为正常对照组的2.0倍(P＜0.01),随后逐渐下降,16 h时约为正常对照组1.7倍(P＜0.01);24 h降为1.5倍(P＜0.05).与TTase表达类似,TTase活性在35.5 mmol·L-1高糖处理后2h开始升高,8h达到高峰,约为正常对照组的1.8倍(Pp＜0.01),随后逐渐下降.GSH在35.5 mmol· L-1高糖处理后16h较对照组明显下降(P＜0.05)GSSG和GSSG/T-GSH比值在35.5 mmol·L-1高糖处理2h后均显著升高,分别约为正常对照组的3.5倍(P＜0.001)和3.3倍(P ＜0.001),并随时间推移不断上升.结论 高糖可诱导晶状体上皮细胞TTase表达上调、活性增强,同时伴GSH的含量下降,GSSG含量上升.