羊口疮病毒B2L和VIR基因原核表达及抗原性鉴定

摘要

为检测羊口疮病毒(Orf virus) B2L和VIR蛋白的抗原性,通过PCR方法扩增出羊口疮病毒B2L和VIR基因,与原核表达载体pET-32a连接,将重组质粒转化到BL21 (DE3)感受态中,对其进行BamH Ⅰ和HindⅢ双酶切鉴定和测序验证.对鉴定为阳性的菌液进行诱导表达,并进行SDS-PAGE分析.用灭活的羊口疮病毒免疫家兔,制备多克隆抗体,Western blot、ELISA鉴定B2L和VIR蛋白的抗原性.结果显示B2L、VIR蛋白均能与兔抗羊口疮病毒抗血清结合,证明B2L、VIR蛋白具有与羊口疮病毒共同的B细胞表位.