一种人源抗狂犬病病毒单克隆抗体的瞬时表达及性质分析

摘要

目的 瞬时表达人源重组抗狂犬病病毒单克隆抗体,并对抗体性质进行分析.方法 PCR法扩增抗体轻、重链可变区并分别构建真核表达质粒;瞬时转染HEK293 EBNA1细胞;抗体经亲和纯化后,CE-SDS法分析纯化后抗体单体比例,用快速荧光灶抑制试验(RFFIT)分析抗体体外抗狂犬病病毒中和活性,ELISA分析抗体与3aG、CTN、PV及CVS株的结合.结果 提取瞬时表达质粒的A260/280 nm比值在2.0～2.1之间纯化后抗体非还原CE-SDS单体纯度为74.4％;还原CE-SDS抗体轻、重链峰合计占比超过95％;抗体RFFIT体外中和活性为293.37 IU/mL,比活达628.21 IU/mg,抗体与3aG、CTN、PV及CVS株交叉反应均为阳性.结论 该株抗体具有较高体外抗狂犬病病毒中和活性,与主要疫苗株均有较强结合.