W135群脑膜炎球菌结合物小鼠免疫血清IgG抗体亚类和亲合力的检测

摘要

目的 通过检测W135群脑膜炎球菌结合物(简称W135群结合物)小鼠免疫血清中IgG抗体亚类及IgG抗体亲合力,判断W135群结合物的免疫应答特征.方法 ①免疫血清的制备:将NIH雌性小鼠随机分为3组(A组、B组、对照组),每组30只.A组采用含2.5 μg多糖的PSW135CNBr-TT分别于0、2、4、8周腹股沟皮下注射小鼠;B组采用含2.5 μg多糖的PSW135CNBr-TT分别于0、4、8周腹股沟皮下注射小鼠;对照组采用含2.5 μg多糖的PSW135分别于0、2、4周腹股沟皮下注射小鼠.分别于每次免疫7d后,经小鼠眼眶静脉采血,分离血清备用;②IgG抗体亚类和亲合力的检测:采用间接ELISA分析各组免疫血清中IgG抗体及IgG抗体亚类含量;采用单一浓度的硫氰酸钾溶液作为洗脱液,用间接ELISA测定免疫血清中IgG相对亲合力.结果 A组和B组获得的小鼠免疫血清,IgG抗体均以IgG1为主(占总IgG抗体的80％以上),IgG抗体及其亚类抗体含量均呈典型的剂次加强效应;对照组各针次免疫血清中的IgG3抗体含量所占比例最高,未见免疫剂次加强效应.A组IgG抗体的相对亲合力分别是46.6％、25.4％、17.6％和47.6％,B组IgG抗体的相对亲合力分别是46.6％、23.6％和48.3％,对照组IgG抗体的相对亲合力分别是92.4％、81.9％和81.0％.结论 W135群结合物小鼠免疫血清呈现典型的胸腺依赖性(thymus dependent,TD)抗原的免疫应答特征.