荻幼穗诱导不同类型愈伤组织的差异

摘要

禾本科芒属植物荻(Miscanthus sacchariflorus)是原产我国的优良能源植物,本研究以采集自滨海盐碱地中的优质耐盐种质资源荻的幼穗为外植体,分析诱导出的不同类型愈伤组织在愈伤诱导率、分化率、生根率及移栽成活率等方面的差异,明确不同类型愈伤组织的分化和植株再生能力,从而建立荻高效再生体系,为荻优质种源的推广扩繁、体细胞筛选和遗传转化奠定基础.结果 表明,最佳愈伤组织诱导培养基为MS+ 3.0 mg.L-1 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+ 0.1 mg.L-1 6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)+ 0.72 g.L-1脯氨酸,以荻幼穗为外植体可以诱导出4种类型的愈伤,分别为黄色愈伤、白色愈伤、紫红色愈伤、透明水渍状愈伤,4种愈伤的诱导率分别为7.01％、61.92％、21.02％和9.72％;最佳分化培养基为MS+ 2.0 mg.L-1 6-BA+ 0.5 mg.L-1萘乙酸(NAA),其中黄色愈伤、白色愈伤和紫红色愈伤均为胚性愈伤组织,其分化率分别为93.16％、90.60％和29.91％;采用1/2MS+ 0.5 mg.L-1 NAA作为生根培养基时,3种胚性愈伤组织所分化出的再生植株生根率均达到100％;将再生植株经过炼苗后,移栽于以消毒蛭石为基质的小花盆中,20d后所有移栽苗全部成活.本研究不仅建立了荻高效再生体系,而且明确了黄色愈伤组织、白色愈伤组织和紫红色愈伤组织均可作为构建荻再生体系的愈伤类型,但白色愈伤组织更容易获得,且分化率显著高于紫红色愈伤组织,而与黄色愈伤组织差异不显著.因此,白色愈伤组织是构建荻高效再生体系的理想愈伤组织类型,同时也是构建高效遗传转化体系进行荻种质改良的基础和必备条件.