利用SSR标记分析一年生黑麦草遗传多样性的取样策略

摘要

一年生黑麦苹(Lolium multi florum)为异花授粉植物,其DNA多态性研究的取样策略与遗传多样性分析的可靠性和效率直接相关.从一年生黑麦草国家审定品种“长江2号”和“特高”中,分别提取50个单株DNA,同时提取5、10、15、20、25和30个单株叶片混合样本的DNA,利用SSR标记进行遗传多态性分析.研究结果表明,取样梯度间多态性信息含量指数(PIC)差异不显著(P＞0.05),但当混合单株样本为20株时,PIC达到最高值；SSR平均等位基因数和单个SSR座位上等位基因种类随样品内单株混合数目增加而增加,当取样量在20株及以上时,等位基因数和等位基因种类趋于稳定,电泳图谱表现基本一致；不考虑稀有等位基因(基因频率≤10％)的漏检,采用20株混合样本能够最大限度保持检出较高频率(＞10％)等位基因,且重演性较好.鉴于此,利用SSR标记分析一年生黑麦草遗传多样性时采用20个单株混合样提取的DNA样本能够有效反映群体间差异.