Luciference标记胰岛及在体外和裸鼠体内的荧光表达研究

摘要

目的探讨慢病毒Luciference标记小鼠胰岛并研究其在体外和裸鼠体内移植后的荧光表达。方法以感染复数10 MOI的慢病毒-LUC胰岛培养液转染培养后的ICR小鼠胰岛,洗涤后再培养24 h后,使用小动物活体光学成像系统观察不同胰岛当量LUC标记后的胰岛在体外的荧光表达量,及在体外培养14 d内的荧光表达。在裸鼠肾被膜下移植后,观察30 d内的体内荧光表达情况。结果经本方法转染LUC基因后的胰岛细胞团活性为(86.7±6.7)%;在小动物活体成像仪中,体外培养的LUC标记胰岛可见有荧光表达,且表达量与胰岛当量有关;体外培养14 d内的荧光表达强度呈现与时间同步增强的趋势;LUC标记胰岛经裸鼠肾被膜下移植后可见荧光长期表达(>30 d),但表达的强度随时间变化有较大差异。结论本研究LUC标记的胰岛可实现在活体状态下长期观察移植至体内胰岛的存活情况,可为后续研究胰岛在移植部位的存活和功效提供一定参考。