多重PCR靶向富集结合高通量测序在子宫内膜癌MMR基因突变筛查中的应用

摘要

目的 探讨多重PCR靶向富集结合高通量测序在子宫内膜癌MMR基因的突变筛查中的应用.方法 选择86例豫西地区子宫内膜癌患者的血液为研究对象,提取样本基因组DNA,应用多重PCR扩增技术靶向富集MMR基因的外显子序列,构建文库后采用高通量测序技术检测分析子宫内膜癌患者中的MMR基因突变情况,采用Sanger测序法验证高通量测序结果,并对有无家族史患者的复发例数、复发时间进行分析统计,对中位无瘤生存时间进行统计.结果 86例样本中发生MMR基因突变的共有66例,总突变率为76.8％,共发现12种非同义单核苷酸变异(SNV)和2种同义SNV.Sanger测序验证结果与新一代高通量测序结果一致.随访结果表明,不同年龄段的中位复发时间差异无统计学意义(P>0.05);有家族史组复发率明显高于无家族史组(P=0.003);无家族史组、有家族史组中位无瘤生存时间分别为(52.33±0.58)月、(36.33±1.21)月,差异具有统计学意义(P<0.001).结论 多重PCR靶向富集结合高通量测序技术用于MMR基因的突变检测成本低、速度快、通量高,可用于对EC高风险女性的早期筛查,从而为EC临床规范化治疗提供更多资料.