低氧对恶性黑素瘤A375细胞中Nodal及细胞迁移相关蛋白表达的影响

摘要

目的 探讨低氧对恶性黑素瘤A375细胞中Nodal及细胞迁移相关蛋白表达的影响.方法 对恶性黑色素瘤A375细胞进行体外培养,细胞分为空白对照组、CoCl2组、SB-431542阻断组和CoCl2+SB-431542组,以氯化钴(CoCl2)诱导构建A375细胞内的低氧环境,SB-431542阻断Nodal信号通路,应用Western Blot技术检测以上不同环境下A375细胞内Nodal、类激活素激酶(ALK7)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和波形蛋白(Vimentin)的表达.结果 不同浓度的SB-431542阻断A375细胞Nodal信号通路后细胞形态无明显改变,以上不同浓度阻断24 h、48 h、72 h时A375细胞增殖活力比较差异有统计学意义(P<0.05),随着时间增加细胞活力明显增强,但是随着浓度增高,细胞活力随之下降,SB-431542对A375细胞增殖的阻断具有剂量和时间依赖性;各组Nodal、MMP2、ALK7、Vimentin的表达量比较差异有统计学意义(P<0.05),CoCl2组A375细胞内Nodal、MMP2、ALK7、Vimentin的表达均较空白对照组上调(P<0.05),与CoCl2组比较SB-431542阻断组、CoCl2+SB-431542组表现为以上蛋白表达下调(P<0.05).结论 低氧环境可诱导恶性黑色素瘤A375细胞中Nodal及MMP2和Vimentin的表达上调,这可能与A375细胞的迁移和侵袭恶化有关,同时通过SB-431542可阻断细胞增殖的Nodal信号通路.