七星瓢虫乙酰辅酶A羧化酶基因克隆及表达分析

摘要

乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-CoA carboxylase,ACC)是脂肪酸合成第一步反应的限速酶,参与长链脂肪酸的合成.本试验基于七星瓢虫Coccinella septempunctataL.转录组数据,探究ACC在滞育七星瓢虫脂代谢中的调控作用.利用RT-PCR和RACE技术从七星瓢虫中克隆得到ACC基因全长,命名为CsACC(GenBank登录号:MT012819),该基因cDNA序列全长7217 bp,开放阅读框(ORF)长为6792 bp,编码2263个氨基酸,预测蛋白质分子量为255.9 kDa,理论等电点(pI)为5.90,无跨膜螺旋结构,无信号肽.通过氨基酸多序列比对分析,结果显示CsACC与鞘翅目的 赤拟谷盗Tribolium castaneum乙酰辅酶A羧化酶同源性较高.利用实时荧光定量PCR技术检测CsACC基因在七星瓢虫正常发育及滞育诱导不同阶段的相对表达量,结果显示,滞育诱导30 d表达量达到最高,滞育诱导60 d、滞育解除期以及正常发育30 d表达量几乎持平.本研究为揭示CsACC基因在脂代谢通路中的调控作用提供理论依据.