农杆菌介导的拟康氏木霉遗传转化及T-DNA插入突变体的筛选

摘要

建立并优化了农杆菌介导转化拟康氏木霉(Trichoderma pseudokoningii SMF2)获得T-DNA插入突变体的体系,在木霉孢子浓度106个/mL、农杆菌A600=0.15～0.20、乙酰丁香酮浓度为250 μmol/mL的条件下共培养36 h转化率最高,转化子可达60～120个/106个孢子.共获得转化子1 000多个,连续转接5代能够稳定遗传,部分转化子表现为生长和形态异常,PCR验证潮霉素B抗性基因已整合进转化子基因组DNA中.该转化体系的建立为开展其生防机理研究和探索菌株改良奠定了基础.