刺五加体细胞胚cDNA文库的构建

摘要

以2,4-D处理的刺五加体细胞胚为实验材料,提取总RNA并分离mRNA合成cDNA,连接到pAP3neoPredigested载体上。采用电穿孔法将重组质粒转化到DH10B中。经测定,原始文库滴度为2.3×106pfu·mL-1,重组率大于95%。插入片段的长度大部分在0.5～2.0kb之间,平均长度为0.96kb,表明刺五加体细胞胚cDNA文库已构建成功。