不同花色矮牵牛细胞色素b5蛋白的cDNA克隆及序列分析

摘要

以云南不同花色矮牵牛的花瓣为材料 ,提取总RNA ,用Oligo (dT)作为引物反转录合成cDNA第一链。以此为模板 ,用根据国外报道的矮牵牛细胞色素b5蛋白的cDNA序列设计合成的引物进行PCR扩 ,均扩增到一条约 4 5 0bp的片段 ,分别克隆到pGEM -T载体上。对重组克隆进行序列分析 ,结果表明所克隆到的矮牵牛细胞色素b5蛋白的cDNA的编码区均含有 4 4 7个核苷酸 ,编码 149个氨基酸残基 ,与国外报道的一致 ;但其核苷酸及氨基酸的序列与国外报道的有所不同 ,即与国外的相比 ,紫红色、蓝紫色矮牵牛中的该cDNA的核苷酸有 1个不同 ,而氨基酸完全相同 ;粉红色、白色矮牵牛中的有 3个核苷酸不同 ,并导致了2个氨基酸的不同。暗示该基因对花色的调控可能与其编码cDNA的一级结构有关。