毒素清含药血清对脂多糖刺激下A549细胞NF-κB/MAPK信号通路的影响

摘要

目的:探讨复方毒素清对肺上皮细胞A549内核因子κB (NF-κB)和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)信号通路的影响,从细胞分子水平揭示毒素清治疗细菌性肺炎的作用机制.方法:LPS刺激肺泡上皮细胞A549,将培养好的A549细胞分为空白组(10％空白药物血清)、模型组(10％空白药物血清和1μg/ml LPS)、毒素清(14g/kg)组(10％含药血清和1μg/ml LPS)、毒素清(28g/kg)组(10％含药血清和1 μg/ml LPS)、毒素清(56g/kg)组(10％含药血清和1μg/ml LPS),然后ELISA检测IL-1、IL-6、IL-8;实时荧光定量PCR测定TLR4mRNA和NF-κB mRNA的表达;Western Blotting检测P38MAPK、JNK46/54、ERK42/44总蛋白和磷酸化蛋白.结果:与空白组相比,模型组细胞L-1β、IL-6、IL-8、TLR4mRNA和NF-κB mRNA的表达以及P38MAPK、JNK46/54、ERK42/44蛋白的磷酸化水平均明显升高;与模型组相比,毒素清(14g/kg、28g/kg、56g/kg)的含药血清组L-1β、IL-6、IL-8、TLR4mRNA和NF-κB mRNA的表达以及P-P38MAPK、P-ERK42/44蛋白的磷酸化水平均明显降低,P-JNK46/54无显著性差异.结论:LPS能够激活肺上皮细胞A549内NF-κB和MAPK信号通路,诱导细胞因子的分泌.毒素清可通过抑制该两条信号通路,减少细胞因子的释放,从而减轻炎症反应.