家蚕核多角体病毒载体稳定高效表达HBeAg条件及其初步应用的研究

摘要

利用已构建的含有HBeAg基因的重组家蚕核多角体病毒rBmHBe ,摸索了HBeAg在家蚕细胞中表达的最佳条件组合 ,细胞接种密度 :(3 .2～ 6 .4)× 10 5细胞 /瓶。病毒接种时间 :细胞接种后 48～ 6 0h。感染复数 (MOI)为 0 .0 4～ 0 .4PFU/细胞。细胞上清经硫铵沉淀、分子筛和阴离子交换柱层析纯化获得电泳纯样品。该样品与E .coli表达的HBeAg相比 ,抗原性高出 10 0倍 ,且与抗HBc交叉反应低至 1%倍。利用该样品建立双抗原夹心法测定抗HBe ,灵敏度高于目前的市售抗HBe试剂盒。