干扰素α-2a的复性DOE研究

摘要

通过DOE(Design of experiment)的方法研究干扰素α-2a(IFNα-2a)蛋白的复性条件,以获得适宜的工业生产条件。以包涵体(Inclusion body,IB)形式在大肠杆菌体内表达的干扰素α-2a蛋白,经过变性、复性后折叠形成天然结构的活性蛋白。通过稀释复性的方法,并对复性液的pH、精氨酸浓度及复性时间进行DOE设计和考察,获得了上述复性参数的工艺范围:复性时间50~60 h,pH(9.9±0.1),精氨酸浓度0.3~0.5 mol/L。复性率为35%~42%,19 min杂质(峰后)小于15%。最终结果表明,精氨酸能有效抑制复性过程中蛋白质的聚集,提高干扰素α-2a折叠效率;从而提高产品收率及该产品的经济效益;pH值的合理选择和复性时间的有效延长可降低19 min杂质含量,进而降低纯化成本。