建立螺旋藻转基因体系初报

摘要

从钝顶螺旋藻单细胞克隆的制备、重组平台的 克隆、同源重组表达质粒的构建、质粒的电激转化和报告基因的表达等方面对螺旋藻转基因 表达系统进行了研究，初步建立起螺旋藻转基因体系。用次氯酸钠溶液处理获得无菌培养系 ；用钠、钙离子混合液处理，获得了可再生的螺旋藻单细胞。用含EDTA的培养基预培养和用 培养基洗涤可分别去除胞外核酸酶活性和抑制胞内核酸酶活性。以氯霉素乙酰转移酶基因替 换大肠杆菌表达质粒pBV220的抗性选择标记，同时插入系列同源重组片段和萤火虫荧光素酶 基因，构建了同源重组表达载体pBVCS01-04L。电激转化螺旋藻S6-4品系单 细胞，获得了具有稳定氯霉素抗性的培养系，并用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳证实了报告基 因的表达。