雷帕霉素对S180肉瘤细胞及CD90、CD133、Notch1蛋白表达的影响

摘要

目的 探讨雷帕霉素对小鼠S180肉瘤细胞生长及抗原分化簇90 (CD90)、抗原分化簇133 (CD133)、神经源性基因同源蛋白(Notch1)蛋白表达的影响.方法 选取处于对数生长期的S180肉瘤细胞,雷帕霉素低、中、高剂量组加入20、50、100 nmol·L-1雷帕霉素,对照组加入等量培养液,采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术法检测细胞周期与凋亡.将KM雄性小鼠随机分为对照组以及雷帕霉素低、中和高剂量组,每组10只.按照人体临床用量的0.5、1.0、2.0倍换算小鼠雷帕霉素用量后灌胃,对照组以等量生理盐水灌胃,每日1次,共3周,构建小鼠S180肉瘤皮下荷瘤模型.末次灌胃后24 h,测定小鼠体质量,记录瘤质量并计算抑瘤率.分别采用免疫荧光染色和免疫组织化学染色检测小鼠肿瘤组织CD90、CD133和Notch1的蛋白表达.结果 雷帕霉素作用S180肉瘤细胞后,细胞增殖抑制率显著升高(P＜0.05),且与作用时间呈正相关;同一作用时间,细胞增殖抑制率随雷帕霉素浓度的增加而升高(P＜0.05);不同浓度雷帕霉素作用S180肉瘤细胞48 h后,细胞阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率显著升高(P＜0.05);免疫荧光染色结果显示,与对照组比较,其他3组小鼠肿瘤组织CD90、CD133和Notch1表达水平显著降低,且随雷帕霉素浓度增加而降低(P＜0.05);免疫组织化学染色结果显示,与对照组比较,其他3组小鼠肿瘤组织CD90、CD133和Notch1表达水平显著降低,且随雷帕霉素浓度增加而降低(P＜0.05).结论 雷帕霉素能通过下调CD90、CD133和Notch1蛋白表达影响S180肉瘤细胞的增殖和凋亡,达到体内外抑瘤作用.