野生茄子cDNA-AFLP分析体系的优化和建立

摘要

以高抗黄萎病的野生茄子托鲁巴姆的根为试材,对影响cDNA-AFLP分析体系的6个关键因素进行分析,以期建立适宜茄子的cDNA-AFLP分析体系,并得到清晰可辨的cDNA-AFLP图谱.结果表明:采用改良的Trizol法提取的RNA较完整,纯度较高；置换合成法合成双链cDNA成本低且效率高；连接产物取原液作为预扩增反应的模板,预扩增产物稀释50倍作为选择性扩增的模板,在25 μL反应体系中加入2μL的MgCl2 (25 mM)和0.2μL的dNTPs(10 mM),可以获得带型丰富且重复性好的结果.