观叶福禄桐ISSR-PCR反应体系的建立及优化

摘要

以福禄桐叶片为试材,采用正交实验和单因子试验,分析模板DNA、MG2、Taq酶、引物和dNTP五个因子对福禄桐ISSR-PCR反应的影响.结果表明:福禄桐ISSR-PCR最佳反应体系为在25 μL反应体系中,模板DNA为15 ng,Mg2+3.0 mmol/L,Taq酶0.5U,引物0.6 μmol/L,dNTP 0.20 mmol/L,通过梯度PCR试验得到相应引物最佳退火温度为47℃;该试验可为福禄桐遗传多样性分析和亲缘关系等提供理论基础.