滑叶藤ISSR-PCR反应体系建立及优化

摘要

为建立和优化滑叶藤ISSR-PCR反应体系,运用正交试验和单因子试验分析模板DNA,TagDNA聚合酶,Primer,Mg2+和dNTPs 5个因子对滑叶藤ISSR-PCR反应影响。结果表明了滑叶藤ISSR-PCR 25μL反应体系中5个因子最佳水平:DNA模板为8.4 ng,TagDNA聚合酶为2.0 u,Primer浓度为0.8 mmol/L,dNTPs浓度为0.68 mmol/L,Mg2+浓度为2.4 mmol/L。该反应体系为利用ISSR分子标记技术研究铁线莲属植物提供了可靠方法。