巨霸杨组培再生体系的建立及潮霉素抗性试验

摘要

以巨霸杨为试材,采用不同植物激素组合及潮霉素不同浓度梯度筛选法,研究了巨霸杨组培再生体系建立及潮霉素对叶片和茎尖苗生长分化的影响.结果表明:诱导叶片芽分化的最佳培养基为MS+6-BA 0.25 mg/L+IBA 0.1 mg/L,再生芽在1/2MS+IBA 0.3 mg/L上生根形成完整植株.通过对无菌苗叶片和茎尖材料不同浓度梯度潮霉素抗性筛选试验,发现潮霉素(Hygromycin)对巨霸杨产生了较为敏感的选择压力,随着培养天数的增加潮霉素的抑制作用越来越明显.同茎尖苗比,叶片对潮霉素更为敏感.叶片培养2d后即有明显受损表现,茎尖苗在培养4d后才出现损伤.14 d后,在4 mg/L潮霉素条件下只有个别叶片在叶柄基部有少量芽分化;6 mg/L以上潮霉素条件下叶片及茎尖苗则全部失绿死亡.经过对比,确定巨霸杨的潮霉素筛选临界浓度范围为4～6 mg/L.该研究为巨霸杨的基因转化奠定了技术基础.