人REV3基因与紫外线诱导突变形成原因的探讨

摘要

目的 利用反义阻断REV3基因表达的人胚肾上皮细胞(HEK293-M-REV3-)检测其对紫外线(UVB)的敏感性及细胞动力学的改变,评价hREV3基因在紫外线诱发突变中的作用.方法 体外培养HEK293-M-REV3-细胞,利用MTT法检测hREV3缺陷细胞系对UVB的敏感性,采用流式细胞技术DNA含量分析法检测细胞周期及DNA倍体指数(DI值)的变化,计算增殖指数PI值.结果 HEK293-M-REV3-细胞系对UVB的IC50为47.97m J/cm2,其敏感性明显比对照细胞高,流式细胞技术检测结果显示,自发状态下HEK293-M-REV3-细胞系的S期比例增加,UVB处理后细胞G3-M期延长,随着处理后培养时间的延长,细胞周期停滞现象更明显,细胞的PI相应的有所改变.结论 阻断hREV3基因表达,细胞对紫外线等物质敏感性增加,提示REV3基因参与哺乳动物细胞易误性跨损伤修复,易引起突变形成,原因可能与细胞周期的改变有关,由于REV3基因的低表达,细胞不能跨越损伤而使细胞周期停滞于致突变物质作用敏感的S期或G2-M期,引起DNA复制叉停滞,最终引起的结果是细胞的凋亡或死亡.