漆酶在对苯二甲酰氯-己二胺缩聚物载体上的固定:物理吸附及共价偶联的比较

摘要

以对苯二甲酰氯(PPTC)和己二胺(HD)的缩聚物作为固定云芝漆酶的载体,研究了物理吸附和化学偶联两种方法对漆酶固定量、固酶比活力、固定漆酶的热稳定性、重复使用性的影响.此外还进一步研究了不同固定策略对固定漆酶动力学参数的影响.实验结果表明:无论采用物理吸附法或是化学偶联法都具有较高的固酶量和固酶比活力.两种方法的固酶量和固定漆酶的比活力分别为:物理吸附法-126 mg/g,1.65 U/mg;化学偶联法-92 mg/g,0.65 U/mg.通过比较两种不同的固酶策略对固酶热稳定性、重复使用性及酶动力学参数的影响后发现:化学偶联法固定漆酶的热稳定性及重复使用性能均优于物理吸附法,但此种方法固酶的表观催化氧化反应速率常数kcat低于物理吸附法固定漆酶的kcat.综合比较,以对苯二甲酰氯与己二胺缩聚物为固酶基元采用化学偶联法固定漆酶应为固定游离漆酶的一种较好的可行方法.