肿瘤坏死因子-α对软骨细胞蛋白聚糖代谢的影响及小白菊内酯的保护作用

摘要

目的探讨小白菊内酯（PAR）对关节软骨细胞蛋白聚糖合成的调节作用。方法软骨细胞取自骨关节炎（OA）患者进行膝关节置换术的股骨髁,随机分为4组:对照组、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）组、PAR 组和 TNF-α+PAR 组。用3种方法测定蛋白聚糖的代谢:（1）测定蛋白聚糖的代谢产物糖胺多糖（GAG）含量。（2）用针对蛋白聚糖单克隆抗体（Mab-383和5D4）,采用 ELISA 法检测培养液中蛋白聚糖的代谢片段含量。（3）半定量 RT-PCR 检测软骨细胞蛋白聚糖、ADAMTS-4、ADAMTS-5、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）和丝裂原活化蛋白激酶-1（MAPK-1）的 mRNA表达。结果 （1）TNF-α+PAR 组培养液中 GAG 的百分含量明显低于 TNF-α组（t=5.92,P=0.02）,其降低程度与 PAR 呈剂量依赖性。（2）TNF-α组培养液中5D4片段的含量明显高于 TNF-α+PAR 组（t=7.93,P=0.016）,而各组间培养液中383片段的含量无差别。（3）TNF-α组的蛋白聚糖mRNA 表达明显低于其他3组（F=133.7,P=0.000）;而其 ADAMTS-5及 MAPK-1的 mRNA 表达明显高于其他3组（F=209.7,117.1;P=0.000）。结论 （1）TNF-α可促进人 OA 关节软骨细胞蛋白聚糖的降解而 PAR 可抑制其降解作用。（2）PAR 可下调 TNF-α导致的 ADAMTS-5及 MAPK-1的mRNA 表达。