N-乙酰半胱氨酸对甲基乙二醛诱导的大鼠海马神经元毒性损伤的保护作用

摘要

目的探讨N-乙酰半胱氨酸（NAC）对甲基乙二醛（MG）诱导的海马神经元损伤的保护作用及可能机制。方法取新生24 h SD大鼠的海马神经元原代培养至第7天,予MG和（或）NAC干预24 h,异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V（Annexin V-FITC）联合碘化丙啶（PI）法检测海马神经元的凋亡率,以2,7-二氢二氯荧光素（DCFH）染色,流式细胞仪测定细胞内活性氧（ROS）水平;采用实时RT-PCR法及Western印迹法检测脑源性神经营养因子（BDNF）及其受体酪氨酸蛋白激酶（TrkB）mRNA和蛋白的表达水平。结果 MG组海马神经元凋亡率（8.80±0.31）%高于对照组（1.60±0.15）%及MG+NAC组（4.83±0.31）%;ROS水平（10 229±946）高于NAC组（2118±320）、对照组（4265±82）、MG+NAC组（3886±415）及预处理（pre）NAC+MG组（2997±606）。与对照组相比,MG组海马神经元BDNF mRNA及蛋白表达水平明显增加,而TrkB mRNA及蛋白表达水平显著下降。与MG组相比,MG+NAC组、pre NAC+MG组海马神经元BDNF mRNA及蛋白表达水平明显降低,而TrkB mRNA及蛋白表达水平明显增加。上述差异均具有统计学意义。结论 MG可能部分通过诱导细胞内ROS产生,导致神经元氧化应激损伤,同时通过抑制TrkB的表达,阻断BDNF-TrkB信号通路。NAC可能通过抗氧化及抗凋亡,且部分通过激活BDNF/TrkB通路发挥神经保护作用。