肝纤维化时骨形态发生蛋白7对肝细胞及肝星状细胞产生胶原的影响

摘要

目的通过体外细胞实验,观察骨形态发生蛋白7（BMP-7）对肝细胞和肝星状细胞产生胶原能力的影响。方法分离免疫性大鼠肝纤维化模型实验动物的肝细胞和肝星状细胞。收集细胞培养液,用酶联免疫吸附法检测其中的细胞外基质;采用免疫荧光技术检测不同剂量和时间的BMP-7处理后转化生长因子（TGF）-β1受体和磷酸化Smad信号通道蛋白的改变;并运用实时PCR从mRNA的水平上检测TGF-β1的表达。结果 50 mg/L的BMP-7分别处理肝细胞和肝星状细胞后,肝细胞中Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原的产生（83%±6%、79%±8%、82%±13%）与对照组（100%）相比,差异均无统计学意义（均P＞0.05）;肝星状细胞中Ⅳ型胶原的产生（78%±9%）亦与对照组差异无统计学意义（P＞0.05）,但Ⅰ、Ⅲ型胶原的产生均明显低于对照组（60%±8%、40%±6%,均P＜0.01）;相同浓度的BMP-7处理组中,未发现TGF-β1结合受体蛋白的表达变化,而Smad2/3通道蛋白的表达减弱;实时荧光定量PCR表明TGF-β1基因在BMP-7处理后表达水平降低了88%（1-O.12）。结论BMP-7具有抑制激活的肝星状细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白产生的作用,其机制为抑制细胞中促纤维化生长因子TGF-β1的信号通道蛋白Smad2/3的活性,并抑制TGF-β1的表达。