终止香烟烟雾暴露后大鼠Th1/Tc1介导气道炎症及调节性T细胞的变化

摘要

目的观察香烟烟雾暴露和终止香烟烟雾暴露后大鼠Th1/Tc1介导气道炎症及支气管肺泡灌洗液（BALF）中调节性T细胞（Treg）的变化。方法将50只健康清洁级雄性Wistar大鼠随机分为5组:12周正常对照组（简称12周对照组）、24周正常对照组（简称24周对照组）、12周香烟烟雾暴露组（简称12周暴露组）、24周香烟烟雾暴露组（简称24周暴露组）、终止香烟烟雾暴露组（简称终止暴露组）。烟熏法复制大鼠气道炎症的动物模型。12周后,12周对照组、12周暴露组处置取材,24周暴露组继续烟熏12周,终止暴露组终止烟雾暴露12周,将后2组及24周对照组处置取材。HE染色观察小气道病理改变,进行气道评分;收集BALF进行细胞学计数和分类计数;酶联免疫吸附法（ELISA）法测BALF中4种细胞因子:Th1/Th2型细胞因子干扰素（IFN）γ、白细胞介素（IL）4及促炎因子IL-8、肿瘤坏死因子（TNF）α的浓度;流式细胞术检测各组大鼠BALF中Treg细胞的比例,RT-PCR检测各组大鼠BALF中Foxp3 mRNA的表达。结果 （1）12周暴露组、24周暴露组、终止暴露组气道炎症评分较12周对照组、24周对照组明显高（均P＜0.01）。24周暴露组、终止暴露组气道炎症评分均较12周暴露组高（均P＜0.01）。（2）与12周对照组、24周对照组相比,12周暴露组、24周暴露组、终止暴露组BALF中IFN-γ、TNF-α和IL-8高,IL-4低（均P＜0.01）。与12周暴露组相比,终止暴露组IFN-γ、IL-4、TNF-α差异均无统计学意义（均P＞0.05）,IL-8较高（P＜0.01）,24周暴露组IFN-γ、TNF-α和IL-8明显高（均P＜0.01）。（3）BALF中Treg细胞比例,12周暴露组（7.4%±0.8%）、24周暴露组（7.8%±1.7%）、终止暴露组（7.0%±1.4%）较12周对照组（4.8%±1.2%）、24周对照组（4.7%±1.2%）高（均P＜0.01）,前3组之间BALF中Treg细胞比例差异均无统计学意义（均P＞0.05）。（4）12周暴露组（0.22±0.02）、24周暴露组（0.23±0.03）、终止暴露组（0.20±0.04）BALF中Foxp3 mRNA表达较12周暴露组（0.13±0.01）、24周暴露组（0.11±0.02）高（均P＜0.01）。前3者之间BALF中Foxp3 mRNA表达差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论香烟暴露致大鼠气道Th1/Tc1介导炎症伴Treg细胞表达增高,终止香烟烟雾暴露后其炎症及Treg细胞高表达仍持续存在,提示该免疫失衡可能是导致终止香烟暴露后Th1/Tc1气道炎症仍持续进展的原因之一。