hRAMP1修饰的骨髓间充质干细胞移植对兔球囊损伤血管再狭窄及心功能的影响

摘要

目的观察受体活性修饰蛋白1（hRAMP1）修饰的骨髓间充质干细胞（MSC）移植对血管再狭窄及心肌梗死后兔心功能的影响及其基因修饰MSC治疗的安全性。方法建立兔心肌梗死早期再灌注模型并行右侧颈动脉球囊损伤（简称双模型）,携带增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的腺病毒转染MSC,实验按数字随机分为hRAMP1转染MSC移植组（hRAMP1-MSC组,n=24）,空病毒转染MSC移植组（MSC组,n=24）和PBS移植对照组（对照组,n=24）组,细胞移植后28 d免疫荧光检测心肌和血管组织MSC归巢和分化及存活情况,免疫组织化学检测心肌血小板-内皮细胞黏附分子（CD31）及血管α-平滑肌抗体（α-SMA）和增殖细胞核抗原表达（PCNA）,HE染色对心肌和血管组织形态学检测,TTC检测心肌梗死面积,超声心动图测定心功能。结果细胞移植28 d,损伤血管内膜有EGFP标记的MSC,EGFP表达位置检测到CD31表达,并沿损伤内膜分布,对照组无EGFP表达;与对照组比较,hRAM P1-MSC和MSC组新生内膜面积（0.15±0.05和0.33±0.08比0.77±0.11）与新生内膜和中膜面积比（0.24±0.07和0.51±0.12比1.09±0.23）均明显低（均P＜0.05）,尤以hRAMP1-MSC组显著（均P＜0.05）;损伤血管增生内膜细胞α-SMA表达阳性,PCNA表达率在对照组最高,MSC组次之,hRAMP1-MSC组最低（0.627±0.049、0.366±0.013和0.120±0.028,均P＜0.05）。与对照组比较,细胞移植后28 d hRAMP1-MSC组和MSC组梗死交界区毛细血管密度增加（44.2±3.8和22.3±1.7比9.3±3.6,均P＜0.05）;心功能均得到改善（射血分数:60.6%±1.5%和50.8%±3.2%比38.2%±2.0%,均P＜0.05）;心肌梗死面积缩小（20.7%±1.4%和33.2%±3.7%比35.6%±2.7%,均P＜0.05）,尤以hRAMP1-MSC组显著。结论 hRAMP1基因修饰MSC较单纯MSC移植更能改善梗死后心脏功能,促进损伤血管内皮修复,而且显示出更强地抑制血管平滑肌细胞增殖作用;外源基因转染不影响MSC向内皮细胞分化潜能。